肠激酶（Enterokinase, EK）是一种高度专一性识别 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶，在Lys的C 端水解多肽。具有高度专一性，水解效率高的特点。可在较宽的pH范围(4.5~9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白。通常用于融合蛋白 N-末端标签的去除。冀百康重组肠激酶采用重组毕赤酵母高效分泌表达技术，经层析纯化、 超滤、酶液配制而制成的重组肠激酶液体。本品氨基酸序列来源于牛肠激酶序列，含有6个组氨酸标签（含6x His-tag），可使用亲和层析除去样品中残留的重组肠激酶。

应用

• 用于融合蛋白的酶切，生物药物生产

优势

• 无动物源性：无动物病毒、无致病物质、无外源因子污染，安全性高。

• 高纯度：经层析纯化，SDS-PAGE 检测为一单主条带，纯度达 95%以上。

• 高特异性：不含其它蛋白酶活性，无非特异性酶切。

• 高耐受性：在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。
  

• 1000L级别以上生产规模，产品批次之间质量稳定。

• 合规性：生产设备和生产环境符合相关法规要求，符合GMP指导原则。

• 质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。

产品中文名同义词：肠蛋白酶、肠胨酶、肠激活酶、肠肽酶

本品仅供研究使用，不得用于动物或人类的诊断或治疗。

运输及储存稳定性

• 运输稳定性：冰袋运输，活性稳定。

• 储存稳定性：于遮光、密封、-15℃及以下环境，可稳定存放 24 个月。在 36 个月时仍可保留 95%以上活 性。在 2~8℃存放，7 天内酶活保持稳定。

• 冻融稳定性：模拟-15℃冰箱存放和室温使用进行冻融测试，冻融 20 次内酶活保持稳定。

推荐使用方法

• 25℃酶切条件为：25mM Tris-HCl pH8.0 体系中融合蛋白 0.1-1mg/ml（蛋白总量 50-100μg），重组EK0.1~2U，酶切16~24小时，用SDS-PAGE检测酶切效果。

• 4℃酶切条件为：可在 4℃对底物进行有效低温酶切，但需要将酶切时间延长至 48~64 小时，或增加2-3倍酶量。低温酶切有时候可获得比25℃更好的酶切效果。

• 在＞200mM咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果会受影响。可参照以下推荐方法进行酶切：

• 1） 为获得理想酶切结果，请将样品透析到25mM Tris-HCl pH 8.0 缓冲液中，再进行酶切；

• 2） 若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在100mM 以下，NaCl 浓度在50mM以下，甘油浓度 5% 以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即1U酶切500μg蛋白）；

• 3） 如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好酶切效果。

• 可对酶切条件进行优化，例如缓冲液pH，融合蛋白浓度，EK的量，以及酶切时间，融合蛋白能在稳定条件下被酶切，用SDS-PAGE检测酶切效果。由于融合蛋白性质与溶液体系不同会导致酶切效果不同，建 议客户进行预实验，以达到最佳酶切效果。

• 去除重组肠激酶的办法：可使用胰蛋白酶抑制剂亲和层析去除重组肠激酶。

注意：不建议 37℃条件下酶切，可能会有非特异性酶切出现。

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